2024年6月13日，北京大学基础医学院、北京大学熏染病研究中心鲁凤民/陈香梅研究团队在JHEP Reports杂志在线揭晓题为“Hepatitis B virus enhancer 1 activates preS1 and preS2 promoters of integrated HBV DNA impairing HBsAg secretion”的研究，该研究剖析了整合HBV DNA泉源HBsAg的转录表达和渗透特征，并展现了相关的分子机制。
在临床实践中，一连的血清HBsAg扫除代表着慢性乙肝患者获得了功效性治愈，是公认的抗病毒治疗理想终点。已知血清HBsAg保存cccDNA和整合HBV DNA两个泉源，现有药物特殊是直接抗病毒药物对整合泉源的HBsAg并无扫除作用，慢性HBV熏染者肝组织中普遍保存的整合HBV DNA是实现功效性治愈的主要阻碍。因此，展现整合HBV DNA的HBsAg表达渗透特征及其分子调控机制将为临床实现功效性治愈提供新的思绪。
该研究首先纳入了563例未经抗病毒治疗的慢性HBV熏染者，发明只管HBeAg阴性患者血清HBsAg水平显著低于HBeAg阳性患者，可是两组患者肝内HBsAg水平却没有差别，据此推测HBeAg阴性患者HBsAg的渗透效率显著低于HBeAg阳性患者。随后，通过盘算渗透型HBsAg水平与胞内潴留HBsAg水平的比例来反应HBsAg相对渗透效率，发明HBeAg阴性患者的HBsAg渗透效率简直更低。而转录组长测序剖析效果显示，差别于HBsAg主要泉源于cccDNA的HBeAg阳性患者，HBeAg阴性患者的HBsAg主要泉源为整合HBV DNA。因此，以上效果提醒整合HBV DNA表达的HBsAg渗透效率显著低于cccDNA。
为进一步探讨整合泉源HBsAg渗透受阻的分子机制，该研究基于患者肝内HBV整合片断的序列特征，参考HBV双链线性DNA（dslDNA）的序列特征构建了p-dslDNA体外模子，并试验验证了该体外整合模子的HBsAg渗透受阻的特征。更为主要的是，该研究发明p-dslDNA转录的2.4 kb RNA占比以及随之而来的L-HBsAg卵白占比均高于模拟cccDNA。同样，在HBeAg阴性患者肝组织中整合HBV DNA转录的2.4 kb RNA占比也高于cccDNA。这一征象与L-HBsAg可以以剂量依赖的方法抑制HBsAg渗透的既往报导相一致。因此，整合HBV DNA过量表达L-HBsAg可能是HBeAg阴性患者HBsAg渗透效率下降和肝细胞内潴留的主要缘故原由。
为了探讨整合HBV优先表达L-HBsAg的分子机制，该研究首先对带有HBV整合的肝癌细胞系PLC/PRF/5举行了转录组长测序，效果发明病毒EnhI元件可能亲近加入了整合HBV DNA片断的转录调控。接着，通过较量p-dslDNA回补CP启动子前后EnhI元件对HBsAg转录水平及卵白水平的影响，证实了整合HBV DNA片断中CP启动子缺失导致了EnhI选择性上调SP1和SP2启动子活性，并且EnhI对SP1启动子具有更强的激活作用。
综上，该研究展现了HBeAg阴性患者HBsAg渗透效率低于HBeAg阳性患者的其缘故原由主要在于，在整合HBV DNA为HBsAg主要泉源的HBeAg阴性患者， L-HBsAg因太过转录表达而占比升高并进而抑制了HBsAg渗透；粕，整合HBV DNA奇异的基序特征，即CP启动子功效性缺失，导致原本优先激活CP启动子的EnhI通过“增强子释放重定位机制”转而激活SP1和SP2启动子，最终导致了SP1和SP2启动子转录活性的失衡。
北京大学基础医学院病原生物学系博士研究生顾智强、北京大学人民医院博士研究生姜倩倩、北京大学基础医学院细胞生物学系硕士研究生阿卜杜热西提·阿卜来提和北京友谊医院陈孝杰医生是该研究的配合第一作者。病原生物学系鲁凤民教授、陈香梅副教授和中山大学黄鸿鑫研究员是该研究的配合通讯作者。该研究获得了中国人民解放军总医院第五医学中心赵景民教授、中山大学隶属第三医院高志良教授、北京友谊医院朱志军教授的支持。该研究受国家重大熏染病专项、国家自然科学基金面上项目、北京市自然科学基金面上项目的资助。
原文链接：https://doi.org/10.1016/j.jhepr.2024.101144
(基础医学院）